即将举行的网络研讨会：实现无需离心的流式细胞术样品制备工作流程的标准化
围绕这一问题，越来越多研究开始尝试寻找能够预测ICI疗效的生物标志物。近期京都大学团队在Nature Communications杂志发表的一项研究《Phenotype of circulating tumor-reactive T cells predicts immune checkpoint inhibitor response in non-small cell lung cancer》，则将目光聚焦到了一个新的方向：外周血中的“肿瘤反应性T细胞（circulating tumor-reactive T cells）”。
研究显示，这类循环中的免疫细胞状态，可能与患者对免疫治疗的响应密切相关。
从肿瘤组织，到“液体免疫组学”
目前临床上常见的免疫治疗预测指标，包括：PD-L1表达、肿瘤突变负荷（TMB）和肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）。但这些指标大多依赖肿瘤组织样本。现实临床中，组织活检往往存在取样困难、重复获取不便、肿瘤异质性影响大和难以动态监测等问题。
因此，研究人员开始关注是否能够通过外周血，动态评估患者真实的抗肿瘤免疫状态？相比组织检测，血液样本具有微创、易重复采集以及更适合长期随访等优势，也使“液体活检型免疫分析”逐渐成为热点方向。
研究关注的核心：真正“识别肿瘤”的T细胞
外周血中存在大量T细胞，但并不是所有T细胞都真正参与了抗肿瘤免疫反应。
该研究的重点在于从循环T细胞中，识别出真正具有肿瘤反应性的细胞群体。研究团队通过：高参数流式细胞术、单细胞RNA测序（scRNA-seq）和TCR测序等技术，对接受ICI治疗的NSCLC患者进行了系统分析。随后，研究者比较了对治疗有响应的患者（Responders）和无明显响应的患者（Non-responders）之间的免疫细胞差异。
一类特殊T细胞，与ICI疗效显著相关
研究发现，在部分患者外周血中，存在一类具有明显激活和抗原刺激特征的CD8 T细胞群体。这些细胞通常表达：PD-1、CD39、TIGIT、CXCL13和HLA-DR等免疫相关marker。值得注意的是，这些细胞并非“静息”状态的普通循环T细胞，而更像是曾经接受过肿瘤抗原刺激、并正在参与免疫应答的T细胞。
进一步分析显示ICI响应患者中，这类细胞比例更高，其TCR存在明显克隆扩增，并且与肿瘤组织中的T细胞克隆高度重叠。这意味着：外周血中的部分T细胞，实际上可能与肿瘤微环境中的抗肿瘤免疫反应直接相关。
“免疫储备状态”，可能决定ICI疗效
这项研究提出了一个值得关注的观点：ICI疗效不仅取决于药物本身，还取决于患者是否已经具备一定的抗肿瘤免疫基础。换句话说：免疫检查点抑制剂更像是在“解除抑制”，而不是从零开始建立免疫反应。如果患者体内原本就存在一定数量的肿瘤反应性T细胞，那么ICI可能更容易发挥作用。而如果缺乏这一基础，单纯解除PD-1/PD-L1通路，未必能够形成有效免疫应答。这一观点，也与近年来肿瘤免疫研究的发展方向高度一致。
外周血免疫分析，正在成为新的研究趋势
该研究的意义不仅在于发现了新的潜在生物标志物，更重要的是：它进一步推动了“液体免疫组学（liquid immunoprofiling）”的发展。相比传统组织分析，外周血免疫分析更适合动态疗效监测、长期随访、多时间点采样和临床标准化流程。同时，随着高维流式、单细胞组学以及TCR谱系分析等技术的发展，研究者也开始更加关注：样本前处理过程是否会影响真实免疫状态。
细胞前处理对免疫表型分析的重要性
对于这类基于外周血免疫表型和单细胞组学的研究而言，研究重点不仅是要“检测到细胞”，而且还非常关注是否能够尽可能保留细胞在体内的原始状态。尤其是在本研究中，研究者需要分析等与T细胞激活、耗竭和肿瘤反应性相关的敏感marker，同时还涉及单细胞RNA测序、TCR克隆分析和稀有细胞亚群识别。因此，样本前处理过程中的机械扰动、细胞损失以及人为激活，都会对最终结果产生影响。
传统离心洗涤虽然是目前广泛使用的标准流程，但在多轮离心、重悬和吸液过程中，可能引入一定程度的细胞应激和批间差异。对于越来越强调“真实免疫状态解析”的研究而言，这类影响也开始受到更多关注。
Curiox的C-Free™免离心洗涤技术，则提供了一种不同的样本处理思路。其通过层流控制完成液体交换，尽量减少高速离心带来的机械应激，提高稀有细胞的保留率，在一些免疫细胞分析场景中，有助于实现更加温和、标准化的细胞处理流程。
对于此类免疫治疗生物标志物研究而言，这类免离心前处理方式的意义，更多体现在：
- 提高稀有细胞的保留率，提高分析的准确性
- 尽可能降低人为处理对免疫表型的影响，保护真实免疫表型
- 标准化的处理流程减少误差，增强多批次实验的可重复性
随着免疫组学研究逐渐从“检测能力”走向“数据真实性与一致性”，细胞前处理流程本身，也正在成为影响研究质量的重要环节之一。
如需了解更多技术细节或获取报价，可访问Curiox官网或联系当地销售代表。
